目的  探讨外周血单个核细胞（PBMCs）中环状RNA（circRNA）在急性缺血性脑卒中（AIS）患者中的表达特征及其潜在生物功能，评估其在AIS诊断和预后中的临床价值。方法 在发现队列中对AIS患者（n=5）和健康对照者（n=5）的PBMCs样本进行全转录组测序，以获得AIS患者PBMCs来源的circRNA表达谱。选取前10个差异表达的circRNAs（DECs），通过功能富集分析探讨其潜在的调控机制。在验证队列（n=60）中使用Real-time PCR进行验证，筛选DECs，分析DECs在AIS临床诊断和预后评估中的价值。结果 在表达差异最大的前10个DECs中，基因本体论（GO）、京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路分析显示，它们的宿主基因主要集中在免疫炎症反应、蛋白质降解和细胞死亡等过程。经Real-time PCR验证，两种circRNA，hsa_circ_0075436和hsa_circ_0005729，在AIS患者中显著下调。受试者工作特征（ROC）曲线分析显示hsa_circ_0075436和hsa_circ_0005729具有较高的诊断性能，且hsa_circ_0075436的表达水平与入院和出院时的美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分成负相关，提示其与病情严重程度和预后相关。结论  DECs宿主基因参与了转录调控、蛋白泛素化及免疫、降解和凋亡等关键通路，其中hsa_circ_0075436 和 hsa_circ_0005729 可能是AIS诊断和预后的潜在生物标志物。

目的  检测突触体相关蛋白25（SNAP25）的表达变化与肌萎缩侧索硬化症（ALS）发病的关系，探讨SNAP25对ALS运动神经元的保护作用，为ALS提供潜在的治疗靶点。方法  通过公共数据库筛选ALS转基因小鼠差异表达基因。聚焦SNAP25，选取36对不同发病时间点hSOD1-G93A突变型ALS转基因小鼠及同窝野生型（WT）小鼠作为动物模型，构建hSOD1-G93A突变型和hSOD1-WT NSC34细胞作为ALS细胞模型，通过Real-time PCR和Western blotting实验进行体内外差异表达验证。应用免疫荧光实验检测小鼠脊髓中SNAP25与神经元核抗原(NeuN)的共定位。过表达hSOD1-G93A突变型NSC34细胞中SNAP25，应用细胞活力试剂盒检测活力变化。诱导突起后分析突起生长的变化，同时检测βⅢ-tubulin和生长相关蛋白 43 (GAP-43)的表达。结果  公共数据库分析结果显示，SNAP25在ALS转基因小鼠脊髓中较WT组异常低表达。动物实验证实，相对于WT小鼠，ALS小鼠脊髓中SNAP25蛋白与mRNA水平均降低；SNAP25在小鼠脊髓中与NeuN共定位，ALS小鼠中SNAP25阳性神经元中SNAP25积分吸光度值下降。细胞实验发现，在hSOD1-G93A突变型 NSC34细胞中SNAP25蛋白及mRNA表达降低，过表达Snap25可提高细胞活力，促进神经突起生长。结论  SNAP25表达下调与ALS病理进程密切相关，上调Snap25可改善hSOD1-G93A 突变型NSC34细胞的存活状态，促进神经突起生长，发挥神经保护作用。

目的  探讨外侧臂旁核（LPB）中痛觉和痒觉特异性神经元的分布特征及其下游投射通路差异。方法 使用雄性C57BL/6小鼠，通过预实验（n=24）确定四环素抑制性基因表达系统（Tet-off）的最佳诱导时间窗为7 d，随后采用Tet-off系统，结合c-Fos启动子驱动的病毒载体及Fos蛋白免疫荧光染色技术，特异性标记LPB中痛觉（LPB^pain）或痒觉（LPB^itch）激活的神经元，并分析LPB不同亚核内LPB^pain与LPB^itch的共标情况（n=7）；利用Tet-off技术结合病毒顺行示踪技术，观察并分析LPB^pain和LPB^itch神经元下游投射靶区差异（n=6）。结果 在不同时间窗内先后给予两种不同伤害性刺激可诱发LPB内大量的绿色荧光蛋白标记的病毒以及红色荧光蛋白标记的Fos表达；荧光显微镜下可见LPB^pain和LPB^itch神经元在LPB的外侧亚核（LPBE）大量共存，增强绿色荧光蛋白（EGFP）标记的痛神经元和Fos（红色）标记痒神经元共标率可达72.9%，EGFP（绿色）标记的痒神经元和Fos（红色）标记痛神经元共标率可达79.5%，而其他亚核共标率相对较低；顺行示踪结果显示，LPB^pain和LPB^itch神经元均主要投射至中央杏仁核（CeA）、中脑导水管周围灰质（PAG）、未定带（ZI）等脑区，总体投射模式高度相似。结论  LPB可以同时被痛和痒刺激激活，但不同亚核对痛、痒的处理方式有差异；LPB^pain和LPB^itch下游投射脑区基本重叠，提示中枢神经系统内痛/痒差异编码可能更多地通过分子差异而非通路差异完成。

目的  探讨在神经病理性痛状态下，小鼠内侧前额叶皮质（mPFC）-丘脑连结核（Re）投射通路的形态学特征。方法  12只成年雄性C57BL/6小鼠按研究方法分为3组: 将逆行示踪剂荧光金（FG）注入坐骨神经分支损伤（SNI, n=3）模型鼠或假手术（sham, n=3）鼠的Re，结合c-Fos免疫荧光染色，观察mPFC内逆行标记神经元的分布和疼痛诱致的活性改变；将红色逆向示踪微粒（Beads, n=3）注入正常小鼠的Re内，结合钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）免疫荧光染色，观察mPFC-Re投射神经元的神经化学特征；将c-Fos启动子依赖的顺行示踪病毒注入SNI鼠的mPFC（n=3），结合钙网膜蛋白（CR）染色，观察与痛反应相关的mPFC-Re投射终末的分布及靶细胞类型。结果  FG及Beads逆行标记神经元主要分布于mPFC的扣带皮质1区（Cg1）、前边缘皮质（PrL）和下边缘皮质（IL）3个亚区的深层（Ⅴ层和Ⅵ层），约96.81%的逆行标记细胞呈CaMKⅡ阳性。SNI导致mPFC内c-Fos及FG/c-Fos双标神经元数量显著减少，以PrL的变化最为显著。C-Fos启动子顺标病毒标记终末主要分布于Re的腹外侧区，并与CR阳性神经元形成密切接触。结论  mPFC-Re通路投射神经元主要为兴奋性谷氨酸能神经元，靶向下游的CR阳性神经元；神经病理性痛可导致mPFC-Re通路活性降低。

目的  探讨螯合锌对小鼠脑缺血急性期神经元焦亡的改善作用。方法  利用30只成年雄性昆明小鼠（25~30 g），按照随机对照的原则分为假手术组（sham）、大脑中动脉闭塞（MCAO）再灌注3 d组（MCAO）及螯合锌组（TPEN），每组10只。各组小鼠行吸入式麻醉，采用线栓法制备MCAO模型，每组小鼠选取缺血1 h再灌注3 d，螯合锌组于再灌注即刻给予腹腔注射锌离子螯合剂TPEN（10 mg/kg），sham组仅进行血管钝性分离。神经功能学评分、2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色、激光散斑成像评估螯合锌对小鼠脑损伤后的保护作用。透射电子显微术、免疫荧光染色、锌探针、Western blotting观察螯合锌对小鼠脑损伤后神经元焦亡的改善情况。转录组测序基因本体论（GO）富集分析，免疫荧光共染色、Western blotting观察螯合锌对黑色素瘤缺乏因子2 (AIM2)、凋亡相关斑点样蛋白 (ASC)、Caspase-1、裂解（cleaved）-Caspase-1、gasdermin(GSDM)家族蛋白GSDMD-N蛋白表达水平。结果  螯合锌改善小鼠神经功能学评分 (P<0.05)，减少小鼠脑梗死体积(P<0.01)。恢复小鼠脑血流灌注量 (P<0.001)。免疫荧光共色结果发现，与模型组比较，螯合锌能够减少神经元内锌离子聚集，减少脑缺血半球的神经元死亡数量，减少游离的锌离子含量。透射电子显微术结果发现，与模型组相比，螯合锌组小鼠脑皮质区的焦亡小体明显减少；通过转录组测序GO富集分析发现脑缺血后的炎症反应以及焦亡大规模爆发。结合Western blotting和免疫荧光结果显示，给予TPEN处理可降低脑缺血损伤引起的AIM2炎症小体蛋白表达 (P<0.05)。结论  在脑缺血急性期，螯合锌对小鼠脑缺血后细胞焦亡介导的损伤具有保护作用。

目的  探讨汉黄芩素（Wog）对乙型肝炎大鼠肝脏组织纤维化的影响及其调控Hippo-Yes相关蛋白（YAP）/含PDZ结合基序的转录共激活因子（TAZ）信号通路的机制。方法  大鼠随机分为正常对照（NC）组，模型（Mod）组、Wog低、中和高剂量组（Wog-L，10 mg/kg，Wog-M，20 mg/kg，Wog-H，40 mg/kg）、Wog-H+Hippo抑制剂组（40 mg/kg Wog+7 mg/kg XMU-MP-1），每组12只；除NC组，其余组均利用乙型肝炎病毒（HBV）建立大鼠模型，每周1次，连续注射3周。ELISA试剂盒检测各组大鼠血清肝功能指标：天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、谷氨酰转肽酶（GGT）、乙型肝炎E抗原（HBeAg）、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）和炎性因子转化生长因子β（TGF-β)、血小板衍生生长因子（PDGF）；肝纤维化指标：Ⅳ型胶原（Col-Ⅳ）、透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原肽（PⅢP）和层粘连蛋白（LN）；羟脯氨酸（Hyp）检测试剂盒检测Hyp水平；HE和Masson染色检测大鼠肝组织形态及纤维化；TUNEL法检测肝组织细胞凋亡；Western blotting检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（Col-Ⅰ）、Hippo-YAP/TAZ信号通路相关蛋白表达；Real-time PCR检测肝组织YAP、TAZ mRNA表达。结果 与NC组相比，Mod组大鼠肝组织中细胞肿胀、排列异常且胶原纤维增生，肝纤维化明显，血清AST、GGT、ALT、HBeAg、HBsAg、TGF-β、PDGF、Col-Ⅳ、PⅢP、LN、HA及肝组织中胶原纤维沉积比例、Hyp水平、α-SMA、Col-Ⅰ蛋白表达和细胞凋亡率等显著升高（P＜0.05），YAP、TAZ蛋白和mRNA水平升高（P＜0.05）；与Mod组相比，Wog各剂量组大鼠的肝组织损伤减轻，血清肝功能相关指标及肝组织中胶原纤维沉积比例、Hyp水平、α-SMA、Col-Ⅰ蛋白表达和细胞凋亡率等显著降低（P＜0.05），YAP、TAZ蛋白和mRNA表达水平降低（P＜0.05）；与Wog-H组比较，加抑制剂组肝组织纤维化损伤明显加重（P＜0.05）。结论  Wog可能通过调控Hippo-YAP/TAZ信号通路活性，减轻乙型肝炎大鼠肝组织纤维化。

目的  评估吲哚-3-酰胺化合物（WCL-3）在体外对肌细胞萎缩的缓解效果及相关机制。方法  通过建立体外激活素A受体ⅡB（ActRⅡB）激酶抑制体系，评估WCL-3对ActRⅡB激酶的抑制效果，基于酶抑制活性结果，对其进行抗肌细胞萎缩和抗脂肪细胞降解研究。采用肌管纤维宽度测定和形态学观察评估WCL-3对肌管萎缩的治疗作用，采用油红O染色定量分析评价WCL-3对脂肪细胞抗脂肪降解作用，并对肌细胞中p-Smad2/3、Smad2/3、p-Akt、Akt、肌萎缩蛋白Fbox-1（Atrogin-1）以及成肌分化因子1（MyoD1）信号蛋白进行Western blotting分析。结果  激酶抑制实验显示，WCL-3对ActRⅡB激酶有强抑制作用，半数抑制浓液（IC50）=4.1 nmol/L。在CT26肿瘤上清和转化生长因子β1（TGF-β1）处理的C2C12小鼠成肌细胞萎缩模型中，WCL-3以剂量依赖的方式缓解肌管萎缩。在分子水平上，WCL-3通过下调Smad2/3的磷酸化水平，抑制Atrogin-1蛋白降解，同时上调Akt的磷酸化水平，促进MyoD1的表达，合成肌肉蛋白，缓解肌肉萎缩。此外，能够改善成熟的3T3-L1小鼠脂肪细胞因CT26上清诱导的脂肪降解。结论  WCL-3主要通过抑制TGF-β/ActRⅡB通路显著改善体外肌细胞萎缩。WCL-3可作为开发肌肉萎缩和脂肪流失治疗的潜在先导化合物。

目的  建立免疫原性细胞死亡（ICD）相关基因标志物体系，揭示其对肺腺癌免疫浸润和预后的调控机制。方法  基于癌症基因组图谱（TCGA）和基因表达总库（GEO）数据库分析肺腺癌（LUAD）中ICD基因表达谱，通过加权基因共表达网络分析（WGCNA）筛选差异表达的ICD相关基因（ICD-RGs）集，建立LASSO-Cox预后模型并开展功能与药物敏感性分析；体外验证BI-2536对LUAD细胞增殖、迁移的抑制作用，并通过3例临床样本的Western blotting验证ICD-RGs表达。结果  ICD相关亚型的差异基因主要富集于氨酰基-转运RNA（tRNA）生物合成，三羧酸循环，碱基切除修复，氧化磷酸化，蛋白质出口，剪接体，抗原处理和提呈，B细胞受体信号通路，趋化因子信号通路，细胞因子与细胞因子受体的相互作用，自然杀伤细胞介导的细胞毒性及T细胞受体信号通路，|NES|＞1，P＜0.05；ICD相关基因与LUAD患者预后及免疫微环境均有一定相关性（均P＜0.05）；BI-2536对A549和H1650两种细胞的增殖、侵袭和迁移均有抑制作用，P＜0.05；通过网络计算器开发的诺莫图有较好的预测机制，随时间变化的受试者工作特征曲线（ROC）及决策曲线分析（DCA）均显示诺莫图对预后的预测结果较好；人类蛋白质图谱数据库（HPA）和Western blotting中显示ICD相关基因在LUAD组织和正常组织中的表达存在差异，P＜0.05。结论  ICD相关基因与LUAD的免疫和预后有显著关联，BI-2536可以作为临床药物抑制LUAD细胞生长迁移和侵袭，介导ICD-RGs通路及生物功能活性。此外，新开发的诺莫图为预测LUAD患者的总生存率提供了一种更方便、更准确的方法。

目的  探讨微RNA let-7a-5p通过调控鼠双微体2（MDM2）/肿瘤蛋白53（p53）信号通路对胃癌细胞凋亡和周期阻滞的作用。方法  收集20对胃癌组织及配对的癌旁组织标本，检测let-7a-5p表达；生物信息学数据库分析let-7a-5p在胃癌中的表达及与预后的关系，预测let-7a-5p的靶基因；构建let-7a-5p过表达和低表达细胞模型；CCK-8、划痕实验、流式细胞术分别检测细胞增殖、迁移、凋亡和周期分布；双荧光素酶报告基因实验验证let-7a-5p与MDM2的靶向关系；Western blotting和Real-time PCR检测MDM2、p53及通路中细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)、细胞髓细胞增生原癌基因（c-myc）、Bcl-2和Bax的表达。结果  与癌旁组织相比，let-7a-5p在胃癌组织中低表达（P＜0.05），且低表达患者预后较差；转染let-7a-5p 模拟物（let-7a-5p mimics）可明显过表达人胃癌细胞HGC-27细胞中let-7a-5p的水平（P＜0.01），而转染let-7a-5p 抑制剂（let-7a-5p inhibitor）可降低人胃癌细胞AGS中let-7a-5p的表达（P＜0.05）。Let-7a-5p过表达可抑制HGC-27的增殖和迁移，促进凋亡和周期阻滞；Let-7a-5p低表达则促进AGS细胞增殖和迁移，抑制凋亡和周期阻滞；Targeiscan数据库和双荧光素酶报告基因实验结果表明，let-7a-5p直接靶向MDM2，负调控其表达；Western blotting和Real-time PCR实验结果表明，let-7a-5p过表达可上调p53和Bax的表达，下调MDM2、Bcl-2、Cyclin D1和c-myc的表达。Let-7a-5p低表达可上调MDM2、Bcl-2、Cyclin D1、c-myc的表达，下调p53、Bax的表达。结论  Let-7a-5p通过抑制MDM2/p53信号通路促进胃癌细胞凋亡和周期阻滞。

目的  探讨高糖条件下U2小核核糖核蛋白相关SURP结构域包含蛋白（U2SURP）影响HCT116结肠癌细胞增殖的分子机制及二甲双胍的作用。方法  取临床结肠癌(CC)和糖尿病结肠癌(DCC)样本各8例；HCT116细胞高糖（33 mmol/L）条件下连续培养8 d，建立体外细胞高糖培养模型；链脲佐菌素（STZ，120 mg/kg）腹腔注射构建C57BL/6糖尿病小鼠，皮下接种MC38细胞建立糖尿病小鼠移植瘤模型。Western blotting 、Real-time PCR检测癌组织及HCT116细胞U2SURP表达水平；利用短发夹RNA（shRNA）敲减U2SURP，CCK-8和集落形成实验分析HCT116细胞的增殖水平，流式细胞术检测细胞周期变化。利用SRAMP和RBP suite数据库筛选U2SURP上游调控因子，在糖尿病小鼠移植瘤和细胞高糖模型中检测其表达水平；构建过表达胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3（IGF2BP3)和敲减U2SURP、IGF2BP3细胞系，检测其在高糖条件下对结肠癌细胞增殖的影响。利用HCT116细胞高糖培养模型，给予二甲双胍（0.0128 mol/L）处理，检测U2SURP及其上游因子的表达、细胞的增殖能力，并分析Akt/糖原合酶激酶-3β（GSK-3β）信号的调控作用。结果  糖尿病结肠癌组织和高糖培养的HCT116细胞U2SURP表达水平与对照组相比显著上调。高糖促进HCT116细胞增殖，敲减U2SURP则可抑制高糖对HCT116细胞的促增殖作用，并诱导细胞S期阻滞。筛选获得U2SURP上游调控因子IGF2BP3，其过表达可促进结肠癌细胞增殖，而敲减则可逆转高糖的促细胞增殖作用。二甲双胍可抑制高糖条件下U2SURP和IGF2BP3的上调，减弱细胞的增殖能力，降低Akt和GSK-3β的磷酸化水平。而抑制Akt可逆转高糖对U2SURP和IGF2BP3的上调作用，激活Akt则降低二甲双胍对U2SURP和IGF2BP3的抑制作用。结论  高糖条件下IGF2BP3通过m6A甲基化调节U2SURP、促进结肠癌细胞增殖；二甲双胍可通过抑制Akt信号通路，降低U2SURP和IGF2BP3的表达，进而抑制高糖对结肠癌细胞增殖的影响。

目的  探讨氨酰转运RNA合成酶复合物相互作用多功能蛋白 1 (AIMP1) 的N端25多肽链（α-ANT）对皮肤损伤后瘢痕形成和愈合过程的作用。方法  利用无菌手术刀或9 mm皮肤打孔器在SPF级CD-1雄性小鼠（n=51）中分别构建全层切口伤口或全层切除伤口2个模型。全层切口伤口模型制作后分为单纯全层切口伤口模型组（空白组，n=9），全层切口伤口模型+ Pluronic凝胶载体组（n=9）及全层切口伤口模型+α-ANT治疗组（60 μmol/L，n=12）；全层切除伤口制作后分为全层切除伤口模型+ Pluronic凝胶载体组（对照组，n=9）及全层切除伤口模型+α-ANT治疗组（60 μmol/L，n=12）。评估伤口愈合程度，HE染色观察肉芽组织病理学变化，Western blotting及免疫荧光检测炎症细胞因子和生长因子表达水平；多功能强力仪检测皮损修复后的拉伸性能；CCK-8和Transwell趋化实验分别检测α-ANT对原代分离中性粒细胞增殖、迁移特性的影响。结果  通过伤口涂抹方式进行外源性α-ANT肽的补充后，α-ANT肽在小鼠全层皮肤创面模型建立后2 h即可富集于伤口边缘。无论是线形（切割伤）、圆形（穿刺伤）伤口，应用α-ANT肽均显著加速创面愈合，减少瘢痕组织生成，同时有效促进皮损愈合后真皮组织结构和机械强度的恢复。Western blotting及免疫荧光结果显示，α-ANT肽给增强ERK 活化，抑制P38 MAPK活化，减少中性粒细胞浸润，增强生长因子的合成。结论  无论皮肤伤口形态如何，α-ANT多肽均可通过调控ERK-P38 MAPK的动态平衡抑制炎症过程中性粒细胞浸润和分泌，显著促进皮肤创面愈合。

目的  通过Meta分析与爱丁堡利手量表（EHI）调查，系统比较全球不同人群的利手分布特征，重点明确以宁夏、甘肃人群为代表的中国西北部人群利手分布规律，并分析其与其他人群的差异。方法  在中国期刊全文数据库（CNKI）和PubMed数据库检索相关文献，经筛选后进行Meta分析；以宁夏、甘肃人群为研究对象，采用EHI采集利手数据，通过EpiData双录入进行数据管理，运用χ²检验和多元Logistic回归分析法分析利手分布特征及影响因素。结果  Meta分析显示，亚洲人群非右利手比率显著低于欧美人群，且利手分布存在显著地域差异。中国宁夏、甘肃人群单因素分析表明，男性左利手比率显著高于女性，中学及专科教育群体的左利手比率高于小学及本科群体，春夏季出生者左利手率更高（P<0.05）。多元Logistic回归分析进一步证实，男性、中学及专科教育水平是左利手的独立影响因素。整合本研究数据后发现，中国人群总体非右利手比率为8.8%，仅高于日本、瑞典（P<0.001），但低于保加利亚等15个国家或地区（P<0.05）；男女群体的利手分布特征与整体人群一致。结论  利手分布存在地域和性别差异，中国宁夏、甘肃人群表现出独特的利手分布模式，且男性左利手比率显著高于女性。

目的  构建“三结合+四融合”实验教学体系，并探讨其在局部解剖学实验教学中的实践效果。方法  构建“三结合+四融合”教学模式，选取成都医学院2021~2022级临床医学本科专业600名学生为研究对象，分别采用传统实验教学法和“三结合+四融合”实验教学法，通过平时测验、课终考核、实验考核、PBL考核和学生对课程的主观认可度等进行评价。结果  各年级实验组学生的平时测验、课终期末考试、实验考试成绩、PBL成绩和学生的主观认可度均优于对照组学生（均P<0.05）。结论  “三结合+四融合”实验教学体系，提高了学生的局部解剖学学习成绩，自主学习能力，实践能力，临床思维能力，创新能力及综合应用知识的能力等关键能力，有助于提高教学效果。